Mètodes microscòpics en Microbiologia

представляют собой способы изучения разнообразных объектов с использованием специального оборудования. mètodes d'investigació microscòpiques són formes d'explorar una varietat d'objectes amb l'ús d'equip especial. Se'ns permet considerar l'estructura de les substàncies i organismes, la magnitud del que està més enllà dels límits de resolució de l'ull humà. L'article fa un breu anàlisi dels mètodes microscòpics.

visió de conjunt

используют в своей практике разные специалисты. Els mètodes moderns d'anàlisi microscòpic utilitzant diferents experts en la seva pràctica. Entre ells es troben els viròlegs, citologia, hematologia, la morfologia i altres. Els principals mètodes d'examen microscòpic es coneixen des de fa molt de temps. La primera és una manera de veure la llum dels objectes. En els últims anys, introduït activament en pràctica, i altres tecnologies. . Per tant, la popularitat de contrast de fase adquirida, luminiscent, la interferència, polarització, infraroig, ultraviolat, el mètode estereoscòpic d'investigació. Tots ells es basen en una varietat de propietats de la llum. . A més, àmpliament utilitzat mètodes de microscòpia d'electrons. Aquests mètodes permeten la objectes de visualització utilitzant un flux direccional de les partícules carregades. Cal assenyalar que aquests mètodes d'estudi no només s'utilitzen en biologia i medicina. в промышленности. mètode molt popular d'estudi microscòpic dels metalls i aliatges en la indústria. Això permet que l'estudi per avaluar el comportament dels compostos per produir tecnologies per reduir al mínim la probabilitat de fractura i major resistència.

formes de llum: característiques

и других объектов базируются на различной разрешающей способности оборудования. Aquests mètodes microscòpics per a l'estudi dels microorganismes i altres instal·lacions basades en diferents resolució equip. Un factor important en això és la direcció de les característiques del feix de l'objecte en si. Aquest últim, en particular, pot ser transparent o opac. D'acord amb les propietats de l'objecte, el canvi de les propietats físiques del flux de llum - la brillantor i color a causa de l'amplitud i la longitud d'ona, avió, fase i la direcció de propagació de l'ona. . Sobre l'ús d'aquestes característiques i construir diferents mètodes microscòpics.

especificitat

Per a l'estudi de les formes dels objectes lleugers, generalment de colors. Això fa que sigui possible identificar i descriure aquestes o altres propietats. Cal que el teixit ha estat fixat, ja que la coloració revelen certes estructures exclusivament en les cèl·lules mortes. En les cèl·lules vives es separen un colorant en forma de vacúols en el citoplasma. Ella no es pinta sobre l'estructura. Però amb els objectes vius i pot ser investigat utilitzant un microscopi de llum. Per a aquest propòsit, de manera vital d'aprenentatge. En aquests casos, un condensador de camp fosc. Està incrustat en el microscopi de llum.

L'estudi dels objectes sense pintar

Es porta a terme mitjançant microscòpia de contrast de fase. Aquest mètode es basa en la difracció del feix d'acord amb les característiques de l'objecte. Durant l'exposició marcat canvi de fase i la longitud d'ona. A la lent de microscopi està present placa translúcida. Viure o fix, però no objectes pintats, per la seva transparència, gairebé no canvien de color, i l'amplitud del feix d'encreuament a través d'ells, el que va provocar només un canvi de la fase de l'ona. Però en aquest cas, després de passar per l'objecte, el flux de llum desviat per la placa. Com a resultat, entre les bigues, manca a través de l'objecte i d'entrar en una llum de fons, la diferència de longitud d'ona es produeix. A un cert valor del seu efecte visual es produeix - l'objecte fosc serà clarament visible sobre un fons clar, o viceversa (d'acord amb les característiques d'una placa de fase). Per obtenir aquesta diferència ha de ser la longitud d'ona d'almenys 1/4.

mètode Anoptralny

Ell és un tipus de mètode de contrast de fase. mètode Anoptralny implica l'ús d'una lent amb plaques especials, que només canvien el color i la brillantor de la llum ambiental. Això amplia enormement les possibilitats d'estudiar objectes vius sense tenyir. , паразитологии при изучении растительных и животных клеток, простейших организмов. contrast de fase La investigació aplicada mètode microscopi en microbiologia, parasitologia en l'estudi de les cèl·lules vegetals i animals, protozous. En el mètode d'hematologia s'utilitza per calcular i determinar la diferenciació de cèl·lules de la sang i la medul·la òssia.

tècniques d'interferència

решают в целом те же задачи, что и фазово-контрастные. Aquests mètodes d'investigació microscòpiques generalment resoldre els mateixos problemes com de contrast de fase. No obstant això, en aquest últim cas, els experts només poden observar els contorns dels objectes. методы исследования позволяют изучать их части, выполнять количественную оценку элементов. Els mètodes d'investigació microscòpiques d'interferència permeten estudiar la seva banda, porten a terme una sèrie d'elements d'avaluació quantitativa. Això és possible a causa de la divisió del feix de llum. Un corrent passa a través de l'objecte de partícules, i l'altra - per. En l'ocular del microscopi es troben i interfereixen. La diferència de fase resultant pot ser determinat pel pes de les diferents estructures cel·lulars. Quan el mesurament seqüencial és amb el predeterminat índex de refracció es pot fixar teixits gruixuts no fixades i objecte d'estar, el contingut de proteïna en el mateix, la concentració de sòlids i aigua, i així successivament. D'acord amb els especialistes de dades rebudes són capaços d'avaluar indirectament la permeabilitat de membrana, l'activitat enzimàtica, el metabolisme cel·lular.

polarització

Es porta a terme per mitjà de Nicol prismes o polaroids tènues. Es col·loquen entre la mostra i la font de llum. позволяет изучать объекты с неоднородными свойствами. mètode de microscòpia de polarització de la investigació en microbiologia ens permet estudiar objectes amb propietats no homogènies. En les estructures isotròpiques la velocitat de propagació de la llum és independent de la pla seleccionat. En el tipus de sistemes de anisòtropes varia en funció de la llum orientada al llarg de l'eix transversal o longitudinal de l'objecte. Si el valor de l'índex de refracció al llarg de l'estructura serà més gran que al llarg de la direcció transversal, crea un doble refracció positiva. Això és típic de molts objectes biològics que han trobat una orientació molecular estricta. Tots ells són anisotrópicas. En aquesta categoria, en particular, les miofibril·les, neurofibrillas, cilis en l'epiteli ciliat, les fibres de col·lagen, i altres.

valor de polarització

Una comparació de la naturalesa de la radiació i l'anisotropia de l'índex de refracció de l'objecte fa que sigui possible estimar l'estructura molecular de l'organització. mètode de polarització serveix com un dels mètodes d'anàlisi histològics utilitzats en la citologia i així successivament. No només els objectes pintats pot ser estudiada a la llum. mètode de polarització fa que sigui possible examinar sense taca i sense fixar - natives - preparacions de talls de teixit.

tècniques fluorescents

Es basen en les propietats de certs objectes donen brillantor a la part blau-violeta dels raigs de l'espectre o UV. Moltes substàncies com ara proteïnes, algunes vitamines, coenzims, drogues, dotats d'un (a) luminescència primària. Altres objectes comencen a brillar afegint un fluorocrom - tints especials. Aquests additius són selectivament difusa o distribuïts en les estructures cel·lulars separades o compostos químics. Aquesta propietat va ser la base de la utilització de la microscòpia fluorescent amb histoquímiques i estudis citològics.

Les àrees d'ús

Ús d'experts immuno-fluorescència detecten antígens virals i la seva concentració ajustada s'identifiquen els virus anti cossos i antígens, hormones, diversos productes metabòlics i així successivament. En aquest sentit, el diagnòstic d'herpes, galteres, hepatitis B, grip i altres infeccions utilitzant mètodes fluorescents de la investigació de materials. иммуно-флуоресцентный способ позволяет распознавать опухоли злокачественного характера, определять ишемические участки в сердце на ранних этапах инфаркта и пр. mètode de immuno-fluorescència microscòpica detecta malignitat del tumor, a determinar àrees isquèmiques del cor en les primeres etapes d'un atac de cor i així successivament.

L'ús de llum ultraviolada

Es basa en la capacitat d'un nombre de substàncies en les cèl·lules vives o microorganismes són fixos, però sense color transparent sota teles de llum visible a absorbir els raigs UV d'una longitud d'ona específica. Això és cert en particular per als compostos d'alt pes molecular. Aquests inclouen proteïnes, àcids aromàtics (metilalanina, triptòfan, tirosina, etc.), àcids nucleics i bases de purina piramidinovye i així successivament. La microscòpia UV permet especificar la ubicació i el nombre d'aquests compostos. En l'estudi dels éssers vius professionals poden observar els canvis en els seus processos metabòlics.

a més

microscòpia d'infrarojos s'utilitza en l'estudi són opacs a la llum i els raigs ultraviolats a través de l'absorció dels objectes de flux estructures la longitud d'ona de 750-1200 nm. Per aplicar aquest mètode no hi ha necessitat de pre-exposar els medicaments per al tractament químic. Típicament, el mètode d'IR s'utilitza en l'antropologia, la zoologia i altres ciències indústria. Pel que fa a la medicina, aquest mètode s'utilitza principalment en oftalmologia i Neuromorfología. Els objectes d'estudi dimensional mitjançant l'ús d'un microscopi estereoscòpic. disseny de maquinari permet el seguiment de l'ull esquerre i dret en un angle diferent. Objectes opacs s'investiguen en relativament baix augment (120 vegades com a molt). estereoscòpiques mètodes s'utilitzen en microcirurgia, Patomorfología en la medicina forense.

microscòpia electrònica

S'utilitza per estudiar l'estructura de les cèl·lules i teixits en els nivells macromoleculars i subcel·lulars. La microscòpia electrònica ens ha permès fer un salt qualitatiu en el camp de la investigació. Aquest mètode és àmpliament utilitzat en la bioquímica, l'oncologia, virologia, morfologia, immunologia, genètica, i altres camps. millora significativa de la resolució proporcionada per l'equip de flux de la capacitat dels electrons que passen a través del camp electromagnètic de buit. Aquest últim, al seu torn, crear lents especials. Els electrons són capaços de passar a través de l'estructura de l'objecte o reflectida d'ells amb desviacions de diferents angles. El resultat es visualitza a la pantalla fluorescent del dispositiu. Si microscòpia de transmissió vista plana s'obté en escanejar respectivament envoltant.

requisits previs

Val la pena assenyalar que abans de l'examen microscòpic electrònic de passi, l'objecte se sotmet a un entrenament especial. En particular, l'ús de la fixació física o química de teixits i organismes. material de biòpsia per secció i, a més, deshidratat, s'incorpora a la resina epoxi, tall de vidre o de diamant ganivets en seccions ultrafines. A continuació, el contrast i l'estudi. El microscopi d'exploració examina la superfície dels objectes. Per a això, es ruixa una substància especial a la cambra de buit.